导演赵林山表示，团队在创作过程中参考了大量真实史料，目的是通过艺术形式传递历史责任，凝聚和平力量。他强调“揭露不代表仇恨，揭露是唤醒”，称《731》是对那些逝去者的告慰。同时，赵林山也提到历史真相的揭露过程任重道远，“这只是开始，它是一场与时间、与遗忘，甚至与有意的掩盖之间的赛跑。电影让历史从‘集体记忆’变为了‘集体感受’，它会让更多受害者后人敢于发声，促使研究者提出新的问题，甚至推动相关历史档案的公开，这个过程远比一部电影漫长”。

香港大公网详细报道了首映活动，同时引用导演赵林山“以影像作证据、影院作法庭”的发言，评价影片的历史价值。新加坡《联合早报》称，在中国人民抗日战争暨世界反法西斯战争胜利80周年的背景下，“主旋律”电影热度升高，早前上映的《南京照相馆》已拿下中国暑期档票房第一，凸显《731》上映的时代意义。

首场放映时间定在9时18分

此前的预售阶段，《731》的票房早早超过1亿元，成为春节档后首部预售票房（不含点映）破亿电影，为正式上映奠定基础，上映首日票房更是表现强劲。《731》还打破了多项影史纪录：上映首日安排25.6万场放映，成为内地影史首映日总场次冠军、内地影史单片单日总场次冠军。

在影片上映前，猫眼平台上该片的“想看人数”已突破446.86万，超越了4年前《唐人街探案3》，刷新该平台“想看人数”纪录。此外，《731》还拿下2025年9月战争片内地票房冠军、2025年第37周内地票房冠军等共计42项成就。有观众注意到，在购票APP上不少影院18日的首场放映都做了特别标注，如“警钟长鸣”“勿忘国耻”“万众一心”“守望和平”等，更有不少影院将首场放映时间定在9时18分。